课程负责人及成员

“细胞生物学实验”教学大纲

一、基本要求

       Ⅲ.荧光显微镜

2 电子显微镜的演示                 2学时        基础         必做
3 细胞凝集反应                     2学时        基础         必做
4 线粒体和液泡系的超活

   显微镜观察                      2学时        基础         必做

三、实验内容

实验一、特殊显微镜及其使用
内容：学习使用暗视场显微镜 、相差显微镜 、荧光显微镜。
目的要求：了解特殊显微镜的结构、成象原理和操作规程，掌握特殊显微镜的正确使用方法和保护方法
主要仪器设备：特殊显微镜

实验二、电子显微镜的演示
内容：学习使用透射电镜、扫描电镜
目的要求：了解电子显微镜的结构、成象原理和操作规程，掌握电子显微镜的正确使用方法。
主要仪器设备：透射电镜、扫描电镜

实验三、细胞凝集反应
内容： 学习细胞凝集素促使血细胞发生凝集的实验过程及原理分析。
目的要求：学习研究细胞凝集反应的方法，了解细胞发生凝集反应的原因。
主要仪器设备：捣碎机，离心管 ，离心机，载玻片，光学显微镜

实验四、线粒体和液泡系的超活染色与观察
内容： 1.活体染色的基本概念和实际应用，常见的活体染色剂；2.生物体内线粒体的基本形态与功能；3.液泡系的组成及在光镜下的形态特点。
目的要求：1.通过制片掌握活体染色方法；2.了解线粒体及液泡系在光镜下的基本形态结构。
主要仪器设备：载玻片，光学显微镜

实验五、叶绿体的分离与荧光观察
内容：学习细胞器分离和荧光染色的一般原理和方法，观察叶绿体的形态与荧光染色情况。
目的要求：1.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法； 2.观察叶绿体地自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。
主要仪器设备：普通离心机、组织捣随机、粗天平、荧光显微镜

实验六、动物细胞微丝束的光学显微镜观察
内容：考马斯亮蓝R250染体外培养细胞的微丝。
目的要求： 1.掌握考马斯亮蓝R250染微丝的染色方法；2.观察光镜下微丝的基本形态和结构。
主要仪器设备：光学显微镜、载玻片、染缸

实验七、DNA的Feulgen 染色法
内容： Feulgen 染色法对鼠的精巢石蜡切片染色，观察染色结果。
目的要求： 学习DNA的Feulgen 染色方法，观察染色结果。
主要仪器设备：光学显微镜、载玻片、染缸

实验八、保护性胶显影剂和硝酸银染核仁组织区的一步染色法
内容：对体外培养细胞进行保护性胶显影剂和硝酸银染核仁组织区的一步染色操作，观察核仁组织区被银染的实验结果。
目的要求： 1.了解核仁组织区被银染的原理；2.掌握保护性胶显影剂和硝酸银染核仁组织区的一步染色法的操作步骤。
主要仪器设备：水浴锅、光学显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、倒置显微镜

实验九、动物细胞培养  传代细胞培养与观察
内容： 学习无菌操作技术及细胞的原代培养技术
目的要求：1.掌握无菌操作技术；2.熟悉细胞的原代培养技术；3.掌握细胞培养所需的仪器、设备；4.了解细胞培养的相关理论。
主要仪器设备： 超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜

四、考核内容：
       实验预习报告的准备、所做实验材料处理、准备，实验的原理、方法、步骤，实验数据的整理、统计、归纳，结果的分析、讨论、总结。
考核方式：实际操作或笔试。
考核要求：考察对细胞生物学实验的基本技能和方法的掌握情况和熟练程度，以及实验结果的分析、讨论等。