生物化学实验考试试题

1．1M硫酸如何配制？

2．1M盐酸如何配制？

3．1M氢氧化钠如何配制

4．蛋白质定量测定的方法有哪些？简要说明其原理

5．索氏提取法提取的为什么是粗脂肪？

6．通过本实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法?它们的原理是什么?

7．何谓蛋白质的等电点和沉淀反应？有何实用意义？

8．何谓纸层析法？

9．何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么

10．试述几种蛋白质含量的测定方法。

11．怎样制备扩展剂？

12．721分光光度计使用时应注意什么？

13．721分光光度计预热时为何要把比色室盖打开，能否用721测定紫外吸收？

14．可见光波长范围为多少？

15．如何用10.0mg/ml的蛋白质溶液配成300μg/ml蛋白质溶液？

16．紫外比色的比色杯有何要求？

17．紫外比色法有何优点？

18．如何判断比色法测定底物浓度时所用的波长？

19．层析缸中平衡溶剂的作用是什么？

20．福林（Folin）—酚法测定蛋白质浓度的测定范围是多少？

21．什么是酶的最适温度及其应用意义？

22．紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理是什么？

23．什么是酶反应的最适pH？pH对酶活性有什么影响？

24．什么是酶的活化剂？

25．什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？

26．如何使用电子天平？

27．使用721分光光度计应注意哪些事项？

28．95%的乙醇如何配制成70%的乙醇？

29．40%的氯化纳如何配制？

30．电泳时所使用的前沿指示剂是什么？其作用是什么？

31．PAGE的原理是什么？

32．电泳时12个泳道是否均可用？

33．何为浓缩效应？

34．蛋白质浓度测定时样品配置时浓度为0.1mg /ml，测得结果为0.08mg /ml，说明了什么？

35．什么是波长扫描？

36．如何用10.0 mg /ml的蛋白母液，配成0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mg /ml的标准蛋白溶液？

37．用紫外吸收法测定蛋白浓度时，同样浓度的不同蛋白质，光密度值是否一定相等？

38．蛋白质的紫外波长扫描时，200nm处有一吸收峰，为什么？

39．若某实验获得的蛋白样品极少，还需有他用，如何测蛋白质浓度？

40．什么是凝胶电泳的分子筛效应？

42．PAGE电泳与葡聚糖凝胶层析的分子筛效应一样吗？

43．对电泳所得的结果如何进行定量分析？

44．在等电点时蛋白质的溶解度为什么最低?试结合你的实验结果加以说明。

45．在本试验中，酪蛋白处于等电点时则从溶液中沉淀析出，所以说凡是蛋白质在等电点时必然沉淀出来，上面这种结论对吗？为什么？请举例说明。

46．甲醛滴定时，加入氢氧化钠溶液滴定的是氨基，而不是羧基，为什么？

47．在电泳样品处理中加入40%蔗糖溶液的作用是什么？

48．Acr、Bis、Tris的全称什么？

49．SDS-PAGE能否用来制备蛋白质样品(分离纯化)?

50. 光聚合的催化剂是什么，什么时候用光聚合?

51. 化学聚合的催化剂是什么？什么时候用化学聚合?

52．凝胶的化学聚合与光聚合有何不同？

53．SDS-PAGE中SDS与蛋白质结合后引起哪些变化?

54．SDS-PAGE样品缓冲液中巯基乙醇的作用是什么?

55．SDS-PAGE中加入SDS的作用是什么?

56．TEMED的全称是什么？它在电泳时起什么作用？

57．电泳时决定凝胶浓度的参数是什么？

58．称量试剂，应用那种纸？

59．如何确定某一待测有色物的最大吸收峰?

60．什么叫波长扫描?

61．721型分光光度计的应用范围，及使用方法。

62．PAGE的不连续系统的意义是什么?

63．在肝脏中提取DNA时为什么要加EDTA？加入SDS有什么作用？

64．何为定性实验和定量实验，它们有什么区别

65．若配制常用酸，标签上有重量百分比，还需什么条件可算出摩尔浓度?

66．说说分析实验结果的基本步骤？

67．怎样配制pH为7.8的磷酸缓冲液？

68．在你设计的试验中,如果实验室没有紫外-可见分光光度计，能否用721-分光光度计？

69．请你设计一个连续性的实验，从大豆中提取大豆球蛋白(提取、分离、纯化、检验)。

70．蛋白质电泳泳带出现拖尾现象，你认为是什么原因?

71．蛋白质电泳分离蛋白质电泳条带集中在负极且分不开，你认为是什么原因, 应做什么调整?

72．何谓消化？如何判断消化终点？

73．凯氏定蛋样品消化时，加入粉末硫酸钾-硫酸铜混合物的作用是什么？

74．固体样品为什么要干燥？

75．如何证明蒸馏器洗涤干净？

76．蒸馏时冷凝管下端为什么要浸在液体中？

77．实验中应如何避免误差？

78．凯氏定蛋实验中，怎样判断所加的NaOH是足够量的？

79．凯氏定蛋测得的蛋白质是什么蛋白质？

80．在利用醋酸纤维膜电泳分离血清蛋白时，要将点样端靠近负极，这是什么道理。

81．测定米氏常数时，我们使用的酶和底物各是什么？用什么来终止反应？

82．酶促反应的初速度与底物什么有关系？

83．测定蛋白质紫外吸收的波长一般是多少, 为什么可以用紫外法测定蛋白质浓度。

84．我们实验中所用的离心机的最大转速是多少？

85．离心机的转子一般分为角转子、连续转子、垂直转子和甩平转子，你在实验中用的是什么类型的转子？

86．试述双缩脲法定量测定蛋白质含量的原理。

87．试述紫外法定量测定蛋白质含量的原理。

88．试述考马斯亮兰法定量测定蛋白质含量的原理。

89．使用离心机时离心管一定要平衡吗？

90．指出下列试剂的作用：

(1)消化含氮样品时使用的浓硫酸、硫酸钾及硫酸期粉末。

(2)蒸馏滴定中的30%氢氧化钠溶液、2％硼酸溶液及2％硼酸溶液中的指示剂。

91．连续电泳和不连续电泳的区别是什么？

92．如何通过凝胶电泳测定蛋白质的分子量？

93．试述分子筛的基本原理。

94．电泳的Rf值如何计算？

95．在SDS—PAGE凝胶电泳实验中，为什么要加SDS，它有什么作用？

96．在绘制标准曲线时，应注意些什么？

97．你还知道其它电泳方法吗?

98．在化学实验中你的实验能力、观察能力及实验设计能力有提高吗？还有什么不足？

99．在生化实验中你都使用过什么仪器？是否全部掌握？如果没有原因是什么？

100．通过这门实验课，你觉得掌握了什么知识？还有什么建议？